食品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制(ppt)
綜合能力考核表詳細(xì)內(nèi)容
食品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制(ppt)
內(nèi)容
食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概述
食品微生物檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制
食品微生物檢驗(yàn)的室間質(zhì)量控制
食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概述
一、質(zhì)量控制相關(guān)定義
質(zhì)量控制:滿足質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動(dòng)。
質(zhì)量保證:為了滿足實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求 ,制定相應(yīng)的計(jì)劃并實(shí)施所進(jìn)行的一系列系統(tǒng)活動(dòng)
質(zhì)量手冊(cè):是描述質(zhì)量系統(tǒng)元素的文件或文件的集合。
二、食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概念
質(zhì)量控制是食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室為了保證檢驗(yàn)結(jié)果實(shí)事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。
三、食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制目的
食品微生物學(xué)的質(zhì)量控制是保證食源性致病菌的培養(yǎng)、分離、鑒定及血清學(xué)試驗(yàn)等的準(zhǔn)確性,避免因操作變化導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤。
四、質(zhì)量控制分類
分為室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)兩個(gè)組成部分
室內(nèi)質(zhì)量控制:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部采取的以對(duì)比分析、跟蹤以及對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的連續(xù)性控制計(jì)劃。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià):通過(guò)互相校準(zhǔn)和/或檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的操作和結(jié)果所進(jìn)行的評(píng)價(jià)。
五、質(zhì)量控制內(nèi)容
室內(nèi)質(zhì)量控制
實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部 質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
外部組織或機(jī)構(gòu) 質(zhì)量評(píng)價(jià)
食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 室內(nèi)質(zhì)量控制
室內(nèi)質(zhì)量控制
一、對(duì)檢驗(yàn)人員的要求
二、操作手冊(cè)
三、檢測(cè)環(huán)境要求
四、設(shè)備/儀器要求
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
六、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
八、檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
十、實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)
一、對(duì)檢驗(yàn)人員的要求
相應(yīng)崗位的人員,應(yīng)具備相應(yīng)的技術(shù)能力,相應(yīng)的技術(shù)能力證明(證書及證件)。
微生物檢驗(yàn)室應(yīng)有相應(yīng)技術(shù)能力的人負(fù)責(zé)室內(nèi)的技術(shù)工作,并設(shè)立質(zhì)量監(jiān)督員。
一、對(duì)檢驗(yàn)人員的要求
高度的主觀判斷力
個(gè)人的技能、經(jīng)驗(yàn)
細(xì)菌學(xué)的專業(yè)水平
二、操作手冊(cè)
各級(jí)人員的職責(zé)和權(quán)限
實(shí)驗(yàn)室安全措施
樣品采集和處理指南
培養(yǎng)基和試劑的配制方法
….等等
三、檢測(cè)環(huán)境要求-房屋要求
房屋要求:足夠?qū)挸?、通風(fēng)、有良好的照明。
房屋內(nèi)墻面及地等應(yīng)采用易于清潔的材料。
房間的設(shè)置應(yīng)根據(jù)工作內(nèi)容加以分用,設(shè)立專用房間。
三、檢測(cè)環(huán)境要求-環(huán)境設(shè)施要求
專用房間的溫濕度控制與記錄(樣品存放室)
特殊環(huán)境的微生物指標(biāo)控制與記錄(無(wú)菌室等)
專用工作室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和定期的檢測(cè)校準(zhǔn)程序。(潔凈室等)
特殊環(huán)境中的專用設(shè)施質(zhì)量控制應(yīng)符合有關(guān)要求(凈化工作臺(tái))
三、檢測(cè)環(huán)境要求
食品微生物學(xué)檢驗(yàn)室要求布局合理,操作區(qū)域與辦公區(qū)域分開。洗滌室、培養(yǎng)室、消毒間、無(wú)菌室應(yīng)分開。無(wú)菌室要設(shè)有套間或緩沖間。微生物檢驗(yàn)室應(yīng)備有自動(dòng)或腳踩式洗手池和固定的消毒設(shè)施。
三、檢測(cè)環(huán)境要求
微生物檢驗(yàn)室應(yīng)制定合理、完善的衛(wèi)生管理制度,采用濕式保潔,定期對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行消毒。對(duì)廢棄物,應(yīng)投入指定的容器內(nèi),經(jīng)無(wú)害化處理后方可排放,,以防某些病原微生物傳播。
三、檢測(cè)環(huán)境要求
需在無(wú)菌條件下工作的區(qū)域應(yīng)以明確標(biāo)識(shí)并能有效地控制、監(jiān)測(cè)和記錄。每天記錄環(huán)境檢測(cè)報(bào)告,并經(jīng)常進(jìn)行空氣落菌實(shí)驗(yàn):定期對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行室內(nèi)環(huán)境消毒。
三、檢測(cè)環(huán)境要求-環(huán)境設(shè)施的相關(guān)技術(shù)指標(biāo)
凈化室、凈化工作區(qū)域、潔凈環(huán)境按國(guó)家及部頒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)。
空氣潔凈度指標(biāo):
檢測(cè)頻率及檢測(cè)方法。一次/月;空氣細(xì)菌檢測(cè)(沉降法)。
四、設(shè)備/儀器要求-總則
滿足開展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的要求。
制定相關(guān)設(shè)備/儀器的作業(yè)指導(dǎo)書。
設(shè)備/儀器需進(jìn)行檢定校準(zhǔn)。
設(shè)備/儀器的運(yùn)行狀況記錄。
維修后設(shè)備/儀器的再校準(zhǔn)或檢查,應(yīng)具有完整的檢查記錄。
溫度計(jì)
實(shí)驗(yàn)室必須要有工作溫度計(jì)和參照溫度計(jì)。
工作溫度計(jì):用于日常溫度檢查。
參照溫度計(jì):用于校正工作的溫度計(jì)。
溫度計(jì)運(yùn)行檢查:一般可采用一次/半年的運(yùn)行檢查。
日常檢查、校準(zhǔn)檢查、運(yùn)行檢查等都應(yīng)做好相應(yīng)的記錄。
培養(yǎng)箱、水浴箱和冰箱的溫度控制
培養(yǎng)箱的溫差要求,一般顯示值與實(shí)測(cè)值相差不大于±1℃,箱體內(nèi)各點(diǎn)溫差(內(nèi)部的溫度均衡性)以及溫度波動(dòng)同樣不大于±1℃。
溫度監(jiān)控方法:可將工作溫度計(jì)置甘油中,放入待測(cè)箱體內(nèi),觀察工作溫度計(jì)的溫度,最好1-2次/天監(jiān)控并記錄。
高壓滅菌鍋的溫度控制(一)
高壓滅菌鍋;可用生物指示菌法(常用)、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法進(jìn)行檢測(cè)。
生物指示菌法是一種高壓滅菌鍋的效果顯示法。
高壓滅菌鍋由專人操作,并做好作業(yè)記錄。
高壓滅菌鍋使用時(shí),內(nèi)置物品不能太多,單位體積內(nèi)的內(nèi)容物(每瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基)不能太多。
高壓滅菌鍋的溫度控制(二)
高壓滅菌鍋溫度波動(dòng)范圍:110,115和121±2℃。
高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。
干燥滅菌箱溫度控制
干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn):用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試。
干燥滅菌箱溫度要求與精確度:160±5 ℃或180 ±5 ℃。
干燥滅菌箱校準(zhǔn)周期一般為一年。
培養(yǎng)基配制用蒸餾水的控制
按設(shè)備說(shuō)明,定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。
檢測(cè)要求:西歐標(biāo)準(zhǔn)為微生物檢驗(yàn)用蒸餾水的特定電導(dǎo)率<0.5ms/m;細(xì)菌數(shù)<50cfu/ml。我們?nèi)粘S玫臉?biāo)準(zhǔn)為 <10ms/m。
檢測(cè)頻率:1次/每月。
蒸餾水定點(diǎn)供應(yīng),并做好相應(yīng)的質(zhì)量控制及記錄。
天平的管理
天平放置要求:無(wú)振動(dòng)、無(wú)氣流影響及水平臺(tái)面上。
天平要有使用記錄。
天平作為計(jì)量?jī)x器是列入國(guó)家強(qiáng)制檢定的范圍,一般1次/年進(jìn)行檢定。
容積的控制(一)
保證高壓滅菌后的稀釋劑滿足標(biāo)準(zhǔn)用量。
采取稱中法來(lái)測(cè)定蒸發(fā)量,體積100ml的稀釋劑起重量為101g。高壓結(jié)束體積偏差不得超過(guò)1%。
采取先高壓后定量分裝,可避免因高壓造成的體積誤差。
對(duì)保存的定量液體應(yīng)在使用時(shí),注意補(bǔ)充容積。
容積的控制(二)
吸管的控制:通過(guò)小計(jì)量容器校準(zhǔn)后使用。
小計(jì)量容器吸管、容量瓶、量筒等玻璃器皿,校準(zhǔn)周期一般為1-2次/一年。
小計(jì)量容器日常使用檢查可每周進(jìn)行一次,包括容器的完整性,并做好相應(yīng)的記錄。
pH計(jì)
pH計(jì)使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。
緩沖液使用有效期:PH4.00 約1年
PH7.00 約6個(gè)月
pH9.00 約6個(gè)月
pH計(jì)的維護(hù):電極外表的定期清洗;
電極敏感性檢測(cè)及極性恢復(fù)。
凈化工作臺(tái)的控制
水平流凈化工作臺(tái)工作區(qū)域,要求潔凈度為100級(jí)。空氣沉降30min,細(xì)菌數(shù)<1個(gè)/皿。垂直流凈化工作臺(tái),細(xì)菌數(shù)<0.49個(gè)/皿.
凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢查頻次:1次/月,采用細(xì)菌沉降檢測(cè)。
凈化工作臺(tái)高效過(guò)濾膜一般為一年更換一次,并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。
紫外線燈的控制
檢測(cè)方法:儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。
前者是通過(guò)專用儀器檢測(cè)紫外燈管發(fā)射的紫外光強(qiáng)度。國(guó)家消毒技術(shù)規(guī)范中表明在距離照射源1米處,要求其強(qiáng)度為90 lx。
生物測(cè)試法:采用一定的菌培養(yǎng)物,經(jīng)一定比例稀釋,菌量控制在200-250個(gè)/0.5ml,涂布平板在紫外燈光下照射2min,同時(shí)設(shè)置普通光源的對(duì)照組,置37℃培養(yǎng)48h,計(jì)算其殺滅率,要求殺滅率達(dá)99%。
顯微鏡的控制
顯微鏡應(yīng)有作業(yè)指導(dǎo)書,日常維護(hù)記錄及自校記錄。
顯微鏡應(yīng)置于無(wú)振動(dòng)、避免灰塵、防潮等要求的環(huán)境。
其它微生物檢測(cè)專用儀器的控制
細(xì)菌鑒定儀、酶標(biāo)儀等設(shè)備,工作中常用陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)其功能的正常性。
儀器的檢定則按檢定或自校作業(yè)指導(dǎo)書進(jìn)行。
儀器的使用登記、校準(zhǔn)計(jì)劃、校準(zhǔn)記錄等文件存檔。
儀器專人使用,操作者應(yīng)持證上崗。
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
高壓滅菌器:定期監(jiān)測(cè)(每月一次)
生物指示劑:嗜熱脂肪芽孢桿菌
化學(xué)指示劑:變色的指示帶
培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱:
每日早、晚兩次溫度觀測(cè),繪制溫度曲線圖
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
厭氧培養(yǎng)裝置:
化學(xué)標(biāo)記: 美藍(lán)
生物學(xué)指標(biāo):銅綠假單胞菌
CO2培養(yǎng)箱 :
每天檢查箱內(nèi)的CO2含量
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
生物安全柜:
定期更換濾網(wǎng),紫外線每3月檢查1次
微生物鑒定儀
及時(shí)更新軟件
每批號(hào)鑒定卡用標(biāo)準(zhǔn)菌株測(cè)定
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
六、培養(yǎng)基質(zhì)量控制
培養(yǎng)基的有效性試驗(yàn)
每一批新制或新購(gòu)的培養(yǎng)基,使用前均須取標(biāo)準(zhǔn)菌株試驗(yàn).
培養(yǎng)基的試驗(yàn)結(jié)果需要加以記錄,項(xiàng)目包括試驗(yàn)日期、試驗(yàn)結(jié)果以及實(shí)驗(yàn)者的簽名等。
培養(yǎng)基質(zhì)量控制
培養(yǎng)基的量:
平板培養(yǎng)基的厚度一般為3mm
(90mm平皿+15-20ml培養(yǎng)基)
斜面不超過(guò)試管的2/3
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (一)
檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法:物理、化學(xué)及生物學(xué)指標(biāo)鑒定
A:感官測(cè)定,檢查其顏色與透明度,培養(yǎng)基應(yīng)澄清,無(wú)渾濁。
B:PH測(cè)定,按各種培養(yǎng)基要求的PH±0.2。
C:生物學(xué)指標(biāo)檢定,無(wú)菌實(shí)驗(yàn)、被檢培養(yǎng)基相應(yīng)細(xì)菌生長(zhǎng)率測(cè)試;菌落大小及特征的檢測(cè)。
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (一)
無(wú)菌試驗(yàn):
每批配好的培養(yǎng)基須進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)
隨機(jī)選取5%-10%的量,如果配制大量的培養(yǎng)基,則任意選取10個(gè)平板或管裝培養(yǎng)基,35℃溫度下過(guò)夜培養(yǎng),證明無(wú)菌生長(zhǎng)為合格
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (二)
生長(zhǎng)率測(cè)試:適用于液體和固體培養(yǎng)基:將菌培養(yǎng)液,用生理鹽水做倍比稀釋,取合適稀釋度進(jìn)行平板計(jì)數(shù),同時(shí)以新鮮配制的國(guó)標(biāo)培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照。
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (三)
菌落大小測(cè)試:劃線分離測(cè)試菌,取10個(gè)菌落測(cè)量直徑大小,其直徑均值與新鮮配制的國(guó)標(biāo)培養(yǎng)基無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
常用培養(yǎng)基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株
常用培養(yǎng)基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株
培養(yǎng)基保存環(huán)境
制成的培養(yǎng)基保存環(huán)境為4℃冰箱,如制成平板則用塑料袋包裝置冰箱保存,
干燥培養(yǎng)基干粉含有活性物質(zhì)或遇熱易分解的物質(zhì)應(yīng)仔細(xì)查看存放條件,多數(shù)也須放在2-8 ℃條件保存。
含有高濃度膽鹽的培養(yǎng)基存放于10-15 ℃。
培養(yǎng)基配制的質(zhì)量控制
培養(yǎng)基的制作過(guò)程必須統(tǒng)一
培養(yǎng)基或添加劑的劑量、pH值、高溫滅菌的時(shí)間或溫度,都需遵照規(guī)定
培養(yǎng)基名稱、本批配制量、配方、配制日期和配制人員姓名都必須詳細(xì)記錄
培養(yǎng)基制備控制程序
培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備必須經(jīng)過(guò)相應(yīng)的鑒定 。
配制培養(yǎng)基所用的用具及容器必須是清潔或是滅菌的。
培養(yǎng)基的配制程序(一)
不同的培養(yǎng)基配制時(shí)注意各類成分的用途。
對(duì)于干燥培養(yǎng)基配制,同樣需要進(jìn)行PH測(cè)驗(yàn)。
培養(yǎng)基的配制程序(二)
配制好的培養(yǎng)基(尤其是糖發(fā)酵管)不宜久放。因?yàn)榕囵B(yǎng)基吸收空氣中的二氧化碳,會(huì)使培養(yǎng)基變酸,從而影響細(xì)菌的生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基中的抑制劑及指示劑一定要精確稱量。
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
染色液的質(zhì)量控制
染色液要標(biāo)明配制或購(gòu)入日期,選用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)菌株作陽(yáng)性及陰性對(duì)照鑒定。
革蘭氏染色用金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌制備濃菌懸液進(jìn)行質(zhì)量控制,每次質(zhì)控與標(biāo)本檢測(cè)同步進(jìn)行。
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
各種染色液的監(jiān)控菌株
染色液 陽(yáng)性對(duì)照菌 陰性對(duì)照菌 監(jiān)控頻度
革蘭染色液 金黃色葡萄球菌 大腸埃希菌 每天
抗酸染色液 結(jié)核分枝桿菌 每次
異染顆粒染色液 白喉棒狀桿菌 每次
莢膜染色液 肺炎克雷伯菌 每批
鞭毛染色液 普通變形桿菌 福氏志賀菌 每次
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
試劑的質(zhì)量控制
各類試劑,在配制或購(gòu)入后均應(yīng)進(jìn)行“有效”試驗(yàn),用已知陽(yáng)性及陰性菌株進(jìn)行試驗(yàn)
試劑須根據(jù)標(biāo)示配制,適當(dāng)儲(chǔ)存
對(duì)較穩(wěn)定的試劑如靛基質(zhì)試劑應(yīng)在配制時(shí)及每周予以檢測(cè),凡不穩(wěn)定的試劑每天使用時(shí)均應(yīng)檢測(cè),合格后才能使用
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
診斷血清的質(zhì)量控制
購(gòu)入的沙門菌屬、志賀菌屬、致病性大腸桿菌的診斷血清必須立即記錄其購(gòu)入日期、觀察透明度、色彩有無(wú)變化和是否有沉淀物,然后置4℃冰箱保存
使用前應(yīng)注意檢查診斷血清的批號(hào)、有效期,如發(fā)現(xiàn)渾濁或有絮狀沉淀物時(shí),很可能系污染所致,不能再繼續(xù)使用
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
診斷血清的質(zhì)量控制
使用前應(yīng)以陽(yáng)性及陰性菌株進(jìn)行檢測(cè),觀察其效價(jià)及特異性
不得將診斷血清置室溫保存,各種診斷血清均應(yīng)置冰箱中4℃保存
每月用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行一次測(cè)定
八、檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制
檢測(cè)質(zhì)量保證
定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制。
參加實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)或能力驗(yàn)證
利用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)
對(duì)留存的樣品進(jìn)行再檢測(cè)。
重復(fù)計(jì)數(shù)要求
菌落計(jì)數(shù)精密度控制直接計(jì)數(shù),選擇同一標(biāo)本,要求檢驗(yàn)人員進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
自身同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差應(yīng)小于7.7%
實(shí)驗(yàn)人員之間同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差±18 .2%
自身同一梯度平行加樣兩皿間相對(duì)誤差小于7.7%
實(shí)驗(yàn)人員之間同一梯度計(jì)數(shù)誤差±18 .2%
不同梯度間菌落計(jì)數(shù)最終誤差小于7.7%
菌種鑒定質(zhì)控
菌種鑒定質(zhì)控要求,對(duì)所給的微生物菌種,按有關(guān)的方法及指標(biāo)進(jìn)行生化、血清等方面的鑒定。
鑒定質(zhì)量評(píng)價(jià):鑒定程序是否正確;鑒定方法是否正確;具體操作技術(shù)是否熟練,結(jié)果報(bào)告是否正確。
內(nèi)部質(zhì)量控制的推薦頻率
菌落計(jì)數(shù)精密度控制: 1次/3月;
菌種鑒定控制: 1次/半年或1年
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株要求
必須是形態(tài)、染色反應(yīng)、生理生化及血清學(xué)特性典型而穩(wěn)定的菌株
實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性好,極少發(fā)生變異
國(guó)際社會(huì)認(rèn)可
來(lái)源于專門機(jī)構(gòu)
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源
美國(guó)典型菌種保藏中心ATCC
衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所菌種保藏中心
國(guó)家醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏中心
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存方法
冷凍干燥法:
最理想的保存方法,不改變菌種性狀,保存時(shí)間長(zhǎng)
手續(xù)繁瑣,需專門的冷凍干燥設(shè)備
菌種保存中心均采用此法
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存方法
冰凍保存法:
此法較簡(jiǎn)單,將細(xì)菌混懸于脫纖維羊血或脫脂牛奶中,置液氮或-20℃冰箱保存
但細(xì)菌經(jīng)多次轉(zhuǎn)種,性狀可能發(fā)生變異
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存方法
培養(yǎng)基保存法:最簡(jiǎn)易方便的方法,適用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室
(1)普通瓊脂斜面保存法:適于一般細(xì)菌的保存,置4℃冰箱可保存1個(gè)月。
(2)血瓊脂斜面保存法:適于鏈球菌,可半月轉(zhuǎn)種一次。
(3)半固體穿刺法:穿刺培養(yǎng)基并加液體石蠟,置4℃冰箱可保存3-6個(gè)月,適用于腸桿菌科細(xì)菌。
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
食品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室必備質(zhì)控菌株:
大腸埃希菌 ATCC25922
大腸埃希菌 ATCC35218
銅綠假單胞菌 ATCC27853
金黃色葡萄球菌 ATCC25923
糞腸球菌 ATCC29212
十、實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)
培訓(xùn)與告之
警示標(biāo)志
防止空氣污染
有毒有害物防護(hù)
消除污染和廢物的處理
食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)是質(zhì)量保證體系的重要組成部分。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部的質(zhì)量控制活動(dòng),對(duì)其開展的每一項(xiàng)檢測(cè)均應(yīng)參加相應(yīng)的室間質(zhì)量控制。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
室間質(zhì)量控制的一般性檢查項(xiàng)目
1、儀器設(shè)備的操作書,使用、保養(yǎng)、維修記錄。
2、培養(yǎng)基和試劑的配制記錄、培養(yǎng)基的保存方法、滅菌質(zhì) 量、有效期。
3、室內(nèi)全面質(zhì)量控制的建立,工作人員熟練程度的考核和盲樣試驗(yàn)的進(jìn)行情況,檢驗(yàn)操作手冊(cè)及操作規(guī)范性
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
熟練程度的考核
用模擬食品標(biāo)本做質(zhì)量評(píng)價(jià)是目前國(guó)內(nèi)外廣泛采用的方法,主要評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室在病原菌的分離、鑒定試驗(yàn)等方面的工作情況。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
熟練程度的考核
由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)發(fā)放模擬標(biāo)本或菌種,實(shí)驗(yàn)室按照日常的操作方法進(jìn)行相應(yīng)的分離鑒定試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室完成鑒定后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)將結(jié)果反饋至參考實(shí)驗(yàn)室,進(jìn)行評(píng)價(jià)。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
質(zhì)控結(jié)果的分析與評(píng)價(jià)
質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)對(duì)每次質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,將每一實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較和統(tǒng)計(jì)分析,發(fā)回評(píng)估報(bào)告。
食品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制(ppt)
內(nèi)容
食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概述
食品微生物檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制
食品微生物檢驗(yàn)的室間質(zhì)量控制
食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概述
一、質(zhì)量控制相關(guān)定義
質(zhì)量控制:滿足質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動(dòng)。
質(zhì)量保證:為了滿足實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求 ,制定相應(yīng)的計(jì)劃并實(shí)施所進(jìn)行的一系列系統(tǒng)活動(dòng)
質(zhì)量手冊(cè):是描述質(zhì)量系統(tǒng)元素的文件或文件的集合。
二、食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概念
質(zhì)量控制是食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室為了保證檢驗(yàn)結(jié)果實(shí)事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。
三、食品微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制目的
食品微生物學(xué)的質(zhì)量控制是保證食源性致病菌的培養(yǎng)、分離、鑒定及血清學(xué)試驗(yàn)等的準(zhǔn)確性,避免因操作變化導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤。
四、質(zhì)量控制分類
分為室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)兩個(gè)組成部分
室內(nèi)質(zhì)量控制:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部采取的以對(duì)比分析、跟蹤以及對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的連續(xù)性控制計(jì)劃。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià):通過(guò)互相校準(zhǔn)和/或檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的操作和結(jié)果所進(jìn)行的評(píng)價(jià)。
五、質(zhì)量控制內(nèi)容
室內(nèi)質(zhì)量控制
實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部 質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
外部組織或機(jī)構(gòu) 質(zhì)量評(píng)價(jià)
食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 室內(nèi)質(zhì)量控制
室內(nèi)質(zhì)量控制
一、對(duì)檢驗(yàn)人員的要求
二、操作手冊(cè)
三、檢測(cè)環(huán)境要求
四、設(shè)備/儀器要求
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
六、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
八、檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
十、實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)
一、對(duì)檢驗(yàn)人員的要求
相應(yīng)崗位的人員,應(yīng)具備相應(yīng)的技術(shù)能力,相應(yīng)的技術(shù)能力證明(證書及證件)。
微生物檢驗(yàn)室應(yīng)有相應(yīng)技術(shù)能力的人負(fù)責(zé)室內(nèi)的技術(shù)工作,并設(shè)立質(zhì)量監(jiān)督員。
一、對(duì)檢驗(yàn)人員的要求
高度的主觀判斷力
個(gè)人的技能、經(jīng)驗(yàn)
細(xì)菌學(xué)的專業(yè)水平
二、操作手冊(cè)
各級(jí)人員的職責(zé)和權(quán)限
實(shí)驗(yàn)室安全措施
樣品采集和處理指南
培養(yǎng)基和試劑的配制方法
….等等
三、檢測(cè)環(huán)境要求-房屋要求
房屋要求:足夠?qū)挸?、通風(fēng)、有良好的照明。
房屋內(nèi)墻面及地等應(yīng)采用易于清潔的材料。
房間的設(shè)置應(yīng)根據(jù)工作內(nèi)容加以分用,設(shè)立專用房間。
三、檢測(cè)環(huán)境要求-環(huán)境設(shè)施要求
專用房間的溫濕度控制與記錄(樣品存放室)
特殊環(huán)境的微生物指標(biāo)控制與記錄(無(wú)菌室等)
專用工作室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和定期的檢測(cè)校準(zhǔn)程序。(潔凈室等)
特殊環(huán)境中的專用設(shè)施質(zhì)量控制應(yīng)符合有關(guān)要求(凈化工作臺(tái))
三、檢測(cè)環(huán)境要求
食品微生物學(xué)檢驗(yàn)室要求布局合理,操作區(qū)域與辦公區(qū)域分開。洗滌室、培養(yǎng)室、消毒間、無(wú)菌室應(yīng)分開。無(wú)菌室要設(shè)有套間或緩沖間。微生物檢驗(yàn)室應(yīng)備有自動(dòng)或腳踩式洗手池和固定的消毒設(shè)施。
三、檢測(cè)環(huán)境要求
微生物檢驗(yàn)室應(yīng)制定合理、完善的衛(wèi)生管理制度,采用濕式保潔,定期對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行消毒。對(duì)廢棄物,應(yīng)投入指定的容器內(nèi),經(jīng)無(wú)害化處理后方可排放,,以防某些病原微生物傳播。
三、檢測(cè)環(huán)境要求
需在無(wú)菌條件下工作的區(qū)域應(yīng)以明確標(biāo)識(shí)并能有效地控制、監(jiān)測(cè)和記錄。每天記錄環(huán)境檢測(cè)報(bào)告,并經(jīng)常進(jìn)行空氣落菌實(shí)驗(yàn):定期對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行室內(nèi)環(huán)境消毒。
三、檢測(cè)環(huán)境要求-環(huán)境設(shè)施的相關(guān)技術(shù)指標(biāo)
凈化室、凈化工作區(qū)域、潔凈環(huán)境按國(guó)家及部頒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)。
空氣潔凈度指標(biāo):
檢測(cè)頻率及檢測(cè)方法。一次/月;空氣細(xì)菌檢測(cè)(沉降法)。
四、設(shè)備/儀器要求-總則
滿足開展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的要求。
制定相關(guān)設(shè)備/儀器的作業(yè)指導(dǎo)書。
設(shè)備/儀器需進(jìn)行檢定校準(zhǔn)。
設(shè)備/儀器的運(yùn)行狀況記錄。
維修后設(shè)備/儀器的再校準(zhǔn)或檢查,應(yīng)具有完整的檢查記錄。
溫度計(jì)
實(shí)驗(yàn)室必須要有工作溫度計(jì)和參照溫度計(jì)。
工作溫度計(jì):用于日常溫度檢查。
參照溫度計(jì):用于校正工作的溫度計(jì)。
溫度計(jì)運(yùn)行檢查:一般可采用一次/半年的運(yùn)行檢查。
日常檢查、校準(zhǔn)檢查、運(yùn)行檢查等都應(yīng)做好相應(yīng)的記錄。
培養(yǎng)箱、水浴箱和冰箱的溫度控制
培養(yǎng)箱的溫差要求,一般顯示值與實(shí)測(cè)值相差不大于±1℃,箱體內(nèi)各點(diǎn)溫差(內(nèi)部的溫度均衡性)以及溫度波動(dòng)同樣不大于±1℃。
溫度監(jiān)控方法:可將工作溫度計(jì)置甘油中,放入待測(cè)箱體內(nèi),觀察工作溫度計(jì)的溫度,最好1-2次/天監(jiān)控并記錄。
高壓滅菌鍋的溫度控制(一)
高壓滅菌鍋;可用生物指示菌法(常用)、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法進(jìn)行檢測(cè)。
生物指示菌法是一種高壓滅菌鍋的效果顯示法。
高壓滅菌鍋由專人操作,并做好作業(yè)記錄。
高壓滅菌鍋使用時(shí),內(nèi)置物品不能太多,單位體積內(nèi)的內(nèi)容物(每瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基)不能太多。
高壓滅菌鍋的溫度控制(二)
高壓滅菌鍋溫度波動(dòng)范圍:110,115和121±2℃。
高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。
干燥滅菌箱溫度控制
干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn):用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試。
干燥滅菌箱溫度要求與精確度:160±5 ℃或180 ±5 ℃。
干燥滅菌箱校準(zhǔn)周期一般為一年。
培養(yǎng)基配制用蒸餾水的控制
按設(shè)備說(shuō)明,定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。
檢測(cè)要求:西歐標(biāo)準(zhǔn)為微生物檢驗(yàn)用蒸餾水的特定電導(dǎo)率<0.5ms/m;細(xì)菌數(shù)<50cfu/ml。我們?nèi)粘S玫臉?biāo)準(zhǔn)為 <10ms/m。
檢測(cè)頻率:1次/每月。
蒸餾水定點(diǎn)供應(yīng),并做好相應(yīng)的質(zhì)量控制及記錄。
天平的管理
天平放置要求:無(wú)振動(dòng)、無(wú)氣流影響及水平臺(tái)面上。
天平要有使用記錄。
天平作為計(jì)量?jī)x器是列入國(guó)家強(qiáng)制檢定的范圍,一般1次/年進(jìn)行檢定。
容積的控制(一)
保證高壓滅菌后的稀釋劑滿足標(biāo)準(zhǔn)用量。
采取稱中法來(lái)測(cè)定蒸發(fā)量,體積100ml的稀釋劑起重量為101g。高壓結(jié)束體積偏差不得超過(guò)1%。
采取先高壓后定量分裝,可避免因高壓造成的體積誤差。
對(duì)保存的定量液體應(yīng)在使用時(shí),注意補(bǔ)充容積。
容積的控制(二)
吸管的控制:通過(guò)小計(jì)量容器校準(zhǔn)后使用。
小計(jì)量容器吸管、容量瓶、量筒等玻璃器皿,校準(zhǔn)周期一般為1-2次/一年。
小計(jì)量容器日常使用檢查可每周進(jìn)行一次,包括容器的完整性,并做好相應(yīng)的記錄。
pH計(jì)
pH計(jì)使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。
緩沖液使用有效期:PH4.00 約1年
PH7.00 約6個(gè)月
pH9.00 約6個(gè)月
pH計(jì)的維護(hù):電極外表的定期清洗;
電極敏感性檢測(cè)及極性恢復(fù)。
凈化工作臺(tái)的控制
水平流凈化工作臺(tái)工作區(qū)域,要求潔凈度為100級(jí)。空氣沉降30min,細(xì)菌數(shù)<1個(gè)/皿。垂直流凈化工作臺(tái),細(xì)菌數(shù)<0.49個(gè)/皿.
凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢查頻次:1次/月,采用細(xì)菌沉降檢測(cè)。
凈化工作臺(tái)高效過(guò)濾膜一般為一年更換一次,并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。
紫外線燈的控制
檢測(cè)方法:儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。
前者是通過(guò)專用儀器檢測(cè)紫外燈管發(fā)射的紫外光強(qiáng)度。國(guó)家消毒技術(shù)規(guī)范中表明在距離照射源1米處,要求其強(qiáng)度為90 lx。
生物測(cè)試法:采用一定的菌培養(yǎng)物,經(jīng)一定比例稀釋,菌量控制在200-250個(gè)/0.5ml,涂布平板在紫外燈光下照射2min,同時(shí)設(shè)置普通光源的對(duì)照組,置37℃培養(yǎng)48h,計(jì)算其殺滅率,要求殺滅率達(dá)99%。
顯微鏡的控制
顯微鏡應(yīng)有作業(yè)指導(dǎo)書,日常維護(hù)記錄及自校記錄。
顯微鏡應(yīng)置于無(wú)振動(dòng)、避免灰塵、防潮等要求的環(huán)境。
其它微生物檢測(cè)專用儀器的控制
細(xì)菌鑒定儀、酶標(biāo)儀等設(shè)備,工作中常用陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)其功能的正常性。
儀器的檢定則按檢定或自校作業(yè)指導(dǎo)書進(jìn)行。
儀器的使用登記、校準(zhǔn)計(jì)劃、校準(zhǔn)記錄等文件存檔。
儀器專人使用,操作者應(yīng)持證上崗。
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
高壓滅菌器:定期監(jiān)測(cè)(每月一次)
生物指示劑:嗜熱脂肪芽孢桿菌
化學(xué)指示劑:變色的指示帶
培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱:
每日早、晚兩次溫度觀測(cè),繪制溫度曲線圖
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
厭氧培養(yǎng)裝置:
化學(xué)標(biāo)記: 美藍(lán)
生物學(xué)指標(biāo):銅綠假單胞菌
CO2培養(yǎng)箱 :
每天檢查箱內(nèi)的CO2含量
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
生物安全柜:
定期更換濾網(wǎng),紫外線每3月檢查1次
微生物鑒定儀
及時(shí)更新軟件
每批號(hào)鑒定卡用標(biāo)準(zhǔn)菌株測(cè)定
五、儀器設(shè)備的功能監(jiān)測(cè)
六、培養(yǎng)基質(zhì)量控制
培養(yǎng)基的有效性試驗(yàn)
每一批新制或新購(gòu)的培養(yǎng)基,使用前均須取標(biāo)準(zhǔn)菌株試驗(yàn).
培養(yǎng)基的試驗(yàn)結(jié)果需要加以記錄,項(xiàng)目包括試驗(yàn)日期、試驗(yàn)結(jié)果以及實(shí)驗(yàn)者的簽名等。
培養(yǎng)基質(zhì)量控制
培養(yǎng)基的量:
平板培養(yǎng)基的厚度一般為3mm
(90mm平皿+15-20ml培養(yǎng)基)
斜面不超過(guò)試管的2/3
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (一)
檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法:物理、化學(xué)及生物學(xué)指標(biāo)鑒定
A:感官測(cè)定,檢查其顏色與透明度,培養(yǎng)基應(yīng)澄清,無(wú)渾濁。
B:PH測(cè)定,按各種培養(yǎng)基要求的PH±0.2。
C:生物學(xué)指標(biāo)檢定,無(wú)菌實(shí)驗(yàn)、被檢培養(yǎng)基相應(yīng)細(xì)菌生長(zhǎng)率測(cè)試;菌落大小及特征的檢測(cè)。
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (一)
無(wú)菌試驗(yàn):
每批配好的培養(yǎng)基須進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)
隨機(jī)選取5%-10%的量,如果配制大量的培養(yǎng)基,則任意選取10個(gè)平板或管裝培養(yǎng)基,35℃溫度下過(guò)夜培養(yǎng),證明無(wú)菌生長(zhǎng)為合格
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (二)
生長(zhǎng)率測(cè)試:適用于液體和固體培養(yǎng)基:將菌培養(yǎng)液,用生理鹽水做倍比稀釋,取合適稀釋度進(jìn)行平板計(jì)數(shù),同時(shí)以新鮮配制的國(guó)標(biāo)培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照。
常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 (三)
菌落大小測(cè)試:劃線分離測(cè)試菌,取10個(gè)菌落測(cè)量直徑大小,其直徑均值與新鮮配制的國(guó)標(biāo)培養(yǎng)基無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
常用培養(yǎng)基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株
常用培養(yǎng)基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株
培養(yǎng)基保存環(huán)境
制成的培養(yǎng)基保存環(huán)境為4℃冰箱,如制成平板則用塑料袋包裝置冰箱保存,
干燥培養(yǎng)基干粉含有活性物質(zhì)或遇熱易分解的物質(zhì)應(yīng)仔細(xì)查看存放條件,多數(shù)也須放在2-8 ℃條件保存。
含有高濃度膽鹽的培養(yǎng)基存放于10-15 ℃。
培養(yǎng)基配制的質(zhì)量控制
培養(yǎng)基的制作過(guò)程必須統(tǒng)一
培養(yǎng)基或添加劑的劑量、pH值、高溫滅菌的時(shí)間或溫度,都需遵照規(guī)定
培養(yǎng)基名稱、本批配制量、配方、配制日期和配制人員姓名都必須詳細(xì)記錄
培養(yǎng)基制備控制程序
培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備必須經(jīng)過(guò)相應(yīng)的鑒定 。
配制培養(yǎng)基所用的用具及容器必須是清潔或是滅菌的。
培養(yǎng)基的配制程序(一)
不同的培養(yǎng)基配制時(shí)注意各類成分的用途。
對(duì)于干燥培養(yǎng)基配制,同樣需要進(jìn)行PH測(cè)驗(yàn)。
培養(yǎng)基的配制程序(二)
配制好的培養(yǎng)基(尤其是糖發(fā)酵管)不宜久放。因?yàn)榕囵B(yǎng)基吸收空氣中的二氧化碳,會(huì)使培養(yǎng)基變酸,從而影響細(xì)菌的生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基中的抑制劑及指示劑一定要精確稱量。
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
染色液的質(zhì)量控制
染色液要標(biāo)明配制或購(gòu)入日期,選用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)菌株作陽(yáng)性及陰性對(duì)照鑒定。
革蘭氏染色用金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌制備濃菌懸液進(jìn)行質(zhì)量控制,每次質(zhì)控與標(biāo)本檢測(cè)同步進(jìn)行。
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
各種染色液的監(jiān)控菌株
染色液 陽(yáng)性對(duì)照菌 陰性對(duì)照菌 監(jiān)控頻度
革蘭染色液 金黃色葡萄球菌 大腸埃希菌 每天
抗酸染色液 結(jié)核分枝桿菌 每次
異染顆粒染色液 白喉棒狀桿菌 每次
莢膜染色液 肺炎克雷伯菌 每批
鞭毛染色液 普通變形桿菌 福氏志賀菌 每次
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
試劑的質(zhì)量控制
各類試劑,在配制或購(gòu)入后均應(yīng)進(jìn)行“有效”試驗(yàn),用已知陽(yáng)性及陰性菌株進(jìn)行試驗(yàn)
試劑須根據(jù)標(biāo)示配制,適當(dāng)儲(chǔ)存
對(duì)較穩(wěn)定的試劑如靛基質(zhì)試劑應(yīng)在配制時(shí)及每周予以檢測(cè),凡不穩(wěn)定的試劑每天使用時(shí)均應(yīng)檢測(cè),合格后才能使用
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
診斷血清的質(zhì)量控制
購(gòu)入的沙門菌屬、志賀菌屬、致病性大腸桿菌的診斷血清必須立即記錄其購(gòu)入日期、觀察透明度、色彩有無(wú)變化和是否有沉淀物,然后置4℃冰箱保存
使用前應(yīng)注意檢查診斷血清的批號(hào)、有效期,如發(fā)現(xiàn)渾濁或有絮狀沉淀物時(shí),很可能系污染所致,不能再繼續(xù)使用
七、試劑、染色液及抗血清的質(zhì)控
診斷血清的質(zhì)量控制
使用前應(yīng)以陽(yáng)性及陰性菌株進(jìn)行檢測(cè),觀察其效價(jià)及特異性
不得將診斷血清置室溫保存,各種診斷血清均應(yīng)置冰箱中4℃保存
每月用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行一次測(cè)定
八、檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制
檢測(cè)質(zhì)量保證
定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制。
參加實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)或能力驗(yàn)證
利用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)
對(duì)留存的樣品進(jìn)行再檢測(cè)。
重復(fù)計(jì)數(shù)要求
菌落計(jì)數(shù)精密度控制直接計(jì)數(shù),選擇同一標(biāo)本,要求檢驗(yàn)人員進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
自身同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差應(yīng)小于7.7%
實(shí)驗(yàn)人員之間同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差±18 .2%
自身同一梯度平行加樣兩皿間相對(duì)誤差小于7.7%
實(shí)驗(yàn)人員之間同一梯度計(jì)數(shù)誤差±18 .2%
不同梯度間菌落計(jì)數(shù)最終誤差小于7.7%
菌種鑒定質(zhì)控
菌種鑒定質(zhì)控要求,對(duì)所給的微生物菌種,按有關(guān)的方法及指標(biāo)進(jìn)行生化、血清等方面的鑒定。
鑒定質(zhì)量評(píng)價(jià):鑒定程序是否正確;鑒定方法是否正確;具體操作技術(shù)是否熟練,結(jié)果報(bào)告是否正確。
內(nèi)部質(zhì)量控制的推薦頻率
菌落計(jì)數(shù)精密度控制: 1次/3月;
菌種鑒定控制: 1次/半年或1年
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株要求
必須是形態(tài)、染色反應(yīng)、生理生化及血清學(xué)特性典型而穩(wěn)定的菌株
實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性好,極少發(fā)生變異
國(guó)際社會(huì)認(rèn)可
來(lái)源于專門機(jī)構(gòu)
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源
美國(guó)典型菌種保藏中心ATCC
衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所菌種保藏中心
國(guó)家醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏中心
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存方法
冷凍干燥法:
最理想的保存方法,不改變菌種性狀,保存時(shí)間長(zhǎng)
手續(xù)繁瑣,需專門的冷凍干燥設(shè)備
菌種保存中心均采用此法
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存方法
冰凍保存法:
此法較簡(jiǎn)單,將細(xì)菌混懸于脫纖維羊血或脫脂牛奶中,置液氮或-20℃冰箱保存
但細(xì)菌經(jīng)多次轉(zhuǎn)種,性狀可能發(fā)生變異
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存方法
培養(yǎng)基保存法:最簡(jiǎn)易方便的方法,適用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室
(1)普通瓊脂斜面保存法:適于一般細(xì)菌的保存,置4℃冰箱可保存1個(gè)月。
(2)血瓊脂斜面保存法:適于鏈球菌,可半月轉(zhuǎn)種一次。
(3)半固體穿刺法:穿刺培養(yǎng)基并加液體石蠟,置4℃冰箱可保存3-6個(gè)月,適用于腸桿菌科細(xì)菌。
九、標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源和保存
食品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室必備質(zhì)控菌株:
大腸埃希菌 ATCC25922
大腸埃希菌 ATCC35218
銅綠假單胞菌 ATCC27853
金黃色葡萄球菌 ATCC25923
糞腸球菌 ATCC29212
十、實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)
培訓(xùn)與告之
警示標(biāo)志
防止空氣污染
有毒有害物防護(hù)
消除污染和廢物的處理
食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)是質(zhì)量保證體系的重要組成部分。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部的質(zhì)量控制活動(dòng),對(duì)其開展的每一項(xiàng)檢測(cè)均應(yīng)參加相應(yīng)的室間質(zhì)量控制。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
室間質(zhì)量控制的一般性檢查項(xiàng)目
1、儀器設(shè)備的操作書,使用、保養(yǎng)、維修記錄。
2、培養(yǎng)基和試劑的配制記錄、培養(yǎng)基的保存方法、滅菌質(zhì) 量、有效期。
3、室內(nèi)全面質(zhì)量控制的建立,工作人員熟練程度的考核和盲樣試驗(yàn)的進(jìn)行情況,檢驗(yàn)操作手冊(cè)及操作規(guī)范性
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
熟練程度的考核
用模擬食品標(biāo)本做質(zhì)量評(píng)價(jià)是目前國(guó)內(nèi)外廣泛采用的方法,主要評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室在病原菌的分離、鑒定試驗(yàn)等方面的工作情況。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
熟練程度的考核
由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)發(fā)放模擬標(biāo)本或菌種,實(shí)驗(yàn)室按照日常的操作方法進(jìn)行相應(yīng)的分離鑒定試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室完成鑒定后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)將結(jié)果反饋至參考實(shí)驗(yàn)室,進(jìn)行評(píng)價(jià)。
室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
質(zhì)控結(jié)果的分析與評(píng)價(jià)
質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)對(duì)每次質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,將每一實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較和統(tǒng)計(jì)分析,發(fā)回評(píng)估報(bào)告。
食品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制(ppt)
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